大鼠肝癌細胞;CBRH-7919CBRH7919培養(yǎng)
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產地 進口/國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2018/5/7 14:51:21
- 訪問次數(shù) 302
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細胞名稱 大鼠肝癌細胞;CBRH-7919[CBRH7919]培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 胎牛血清,20%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
大鼠肝癌細胞;CBRH-7919[CBRH7919]培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
大鼠肝癌細胞;CBRH-7919[CBRH7919]培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
大鼠肝癌細胞;CBRH-7919[CBRH7919]培養(yǎng)懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-LIR-8/CD85c/LILRB5/FITC 熒光素標記白細胞免疫球蛋白樣受體8抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-Survivin/PE 熒光素PE標記細胞凋亡抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1腎上腺素能受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-Goat IgM/RBITC 羅丹明標記的兔抗羊IgM 0.3ml
GRIK1 英文名稱: 谷酸受體紅藻酸離子1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗狗IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-Survivin/PE 熒光素PE標記細胞凋亡抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Lymphotactin 大鼠淋巴細胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-E.coli DH-5 Alpha DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MUL1/RNF218 E3泛素連接酶MUL1抗體 規(guī)格 0.2ml
MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集素 96T
SAPK3 英文名稱: 原活化蛋白激酶磷酸酶p38γ抗體 0.1ml
CHRNA10 英文名稱: 型乙酰膽堿受體α10/AChRα10抗體 0.2ml
Anti-E.coli DH-5 Alpha DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗豬IgG 0.1ml
GLK 英文名稱: 葡萄糖激酶抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-IL-6/FITC 熒光素標記白介素6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗長爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Anti-PS-1(CT)/FITC 熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
大鼠肝癌細胞;CBRH-7919[CBRH7919]培養(yǎng)Anti-SIAH2/FITC 熒光素標記泛素連接酶Siah2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
H5N1流感病毒M2型抗體 Anti-H5N1-M2 0.2ml
Dog IgM/FITC FITC標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM13C1 英文名稱: FAM13C1蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RUNX1(Ser266) 磷酸化急性髓細胞白血病1蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG 兔抗豬IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg