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非平滑肌肌球蛋白2A抗體操作步驟

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供貨周期 現貨

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產品編號 BYK-8564R
英文名稱 non-muscle Myosin IIA
中文名稱 非平滑肌肌球蛋白2A抗體
別    名 non-muscle IIa; type A; Cellular myosin heavy chain; Cellular myosin heavy chain type A; DFNA 17; DFNA17; EPSTS; FTNS; MHA; MYH 2A; MYH 9; MYH2A; MYH9; MYH9_HUMAN; MYHas8; MyHC 2A; MyHC IIa; MyHC2A; MyHCIIa; MYHSA 2; MYHSA2; Myosin 9; Myosin heavy chain 9; Myosin heavy chain 9 non muscle; Myosin heavy chain; Myosin heavy chain non muscle IIa; Myosin heavy chain nonmuscle IIa; Myosin heavy polypeptide 2; Myosin heavy polypeptide 9 non muscle; Myosin-9; Myosin9; NMHC II A; NMMHC A; NMMHC II a; NMMHC II-a; NMMHC IIA; NMMHC-A; NMMHC-IIA; NMMHCA; Non muscle myosin heavy chain A; Non muscle myosin heavy chain; Non muscle myosin heavy chain II A; Non muscle myosin heavy polypeptide 9; Non-muscle myosin heavy chain A; Non-muscle myosin heavy chain IIa; Nonmuscle myosin heavy chain A; Nonmuscle myosin heavy chain II A.  
分 子 量 216kDa
細胞定位 細胞漿 
性    狀 Lyophilized or Liquid
濃    度 1mg/ml
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human non-muscle Myosin IIA:1801-1960/1960 
亞    型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.

保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C

 

非平滑肌肌球蛋白2A抗體操作步驟免疫組化操作流程
(一) 儀器設備
1. 18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或用微波爐.
2. 水浴鍋
(二) 試 劑
1. PBS緩沖液(ph7.2―7.4):NaC137mmol/L,KCl 2.7mmol/L ,Na2HPO4 4.3mmol/L,
KH2PO4 1.4mmol/L.
2.0.01mol/L檸檬酸鈉緩沖液(CB,ph6.0,1000ml):檸檬酸三鈉3g,檸檬酸0.4g。
3.0.5mol/L EDTA緩沖液(ph8.0):700ml水中溶解186.1g EDTA&
8226;2H2O,用10mmol/L
NaOH調至ph8.0,加水至1000ml.
4. 1mol/L的TBS緩沖液(ph8.0):在800ml水中溶解121gTris堿,用1N的HCl調至ph8.0,加水1000ml。
5. 酶消化液:a. 0.1%胰蛋白酶:用0.1%CaCl 12(ph7.8)配制。b.0.4%胃蛋白酶液:用0.1N的HCl配制。
6. 3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配制
7. 風裱劑:a. 甘油和0.5mmol/L碳酸鹽緩沖液(ph9.0–9.5)等量混合
b 油和TBS(PBS)配制
8.TBS/PBS PH9.0–9.5,適用于熒光纖維鏡標本;ph7.0-7.4適合光學纖維標本。
(三) 操作流程
1 脫蠟和水化:脫蠟前應將組織芯片在室溫中放置60分鐘或60℃恒溫箱中烘烤20分鐘。 a 組織芯片置于二甲苯中浸泡10分鐘,更換二甲苯后在浸泡10分鐘
b 無水乙醇中浸泡五分鐘
c 95%乙醇中浸泡五分鐘
d 75%乙醇中浸泡五分鐘
2 抗原修復:用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片:
A 抗原熱修復
a 高壓熱修復 在沸水中加入EDTA(ph8.0)或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液(ph6.0).蓋上不銹鋼鍋蓋,但不能鎖定。將玻片置于金屬染色加上,緩慢加壓,是玻片在緩沖液中浸泡五分鐘,然后將蓋子鎖定,小閥門將會升起來。10分鐘后除去熱源,置入涼水中,當小閥門沉下去后打開蓋子。此方法適用于較難檢測或核抗原的抗原修復。
b 沸熱修復 電爐或水浴鍋加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液(ph6.0)至95℃左右,放入組織芯片加熱10-15分鐘。
C 微波爐加熱 在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液(ph6.0)至沸騰后將組織芯片放入,斷電,間隔5-10分鐘,反復1-2次。

 

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