人細胞角蛋白(CK-18)試劑盒

人細胞角蛋白(CK-18)試劑盒——依托復旦大學，集研發、銷售、實驗室技術服務的產品涉及分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質學、細胞治療、臨床應用等領域。

產品簡介:"專業經營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養基、一抗、二抗、其產品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高， 代做ELISA實驗等。"

供應商 :拜力生物

貨期 :7-10天

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。

5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。

7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。

建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

◇      液體類標本:標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。

◇      血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

◇      血漿：應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

◇      尿液、胸腹水、腦脊液：用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

◇      細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結合物 半抗原反應 半抗原載體結合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細胞質蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細胞裂解 組織提取 重組細胞因子
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細菌克隆載體 文庫及構建 cDNA文庫 基因組文庫 噬菌體展示文庫
【酶】限制性內切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長基因 RNA cDNA合成 cDNA相關試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產物純化
【RNAi技術】 siRNA 反義寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文庫
【蛋白檢測】 Western印跡 報告基因檢測 蛋白檢測試劑盒
【實驗動物】 轉基因動物 小鼠 大鼠 模式動物
【臨床檢測試劑】 生化檢測 遺傳學檢測 血液檢測
【相關檢驗試劑】 食品安全檢測 藥品安全檢測
【蛋白純化】 蛋白提取 蛋白透析 蛋白定量 蛋白穩定
【細胞培養】 血清 血清替代物 細胞培養基 細胞 細胞株 感受態細胞 新鮮細胞分離
【干細胞】 干細胞/祖細胞 原代細胞 干細胞培養基
【蛋白修飾】 蛋白標記 載體蛋白結合 其它
【細胞生物學檢測】 細胞凋亡 細胞分離 細胞增殖
【藥物篩選】 熒光素細胞活力/增殖/毒性檢測
【免疫檢測】 放射性免疫檢測 化學發光免疫檢測

完整的ELISA試劑盒包含以下各組分： (1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)； (2)酶標記的抗原或抗體(結合物)； (3)酶的底物； (4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中)； (5)結合物及標本的稀釋液； (6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水； (7)酶反應終止液，常用的HRP反應終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液終體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。

實驗技術服務：熒光定量pcr服務、hplc(高效液相色譜法檢測)服務、emsa(凝膠遷移或電泳遷移率實驗)、酶聯免疫(elisa)實驗技術服務、免疫組化(ihc)技術服務、rna干擾(sirna,miran)、雙向電泳、免疫共沉淀、科研整體實驗外包服務、流式細胞檢測服務、細胞培養技術服務、四甲基偶氮唑鹽比色法(mtt方法、sci生物醫學論文服務、熒光原位雜交fish服務、載體構建實驗技術服務、抑制性消減雜交(ssh)技術服務、單核苷酸多態性分析(snp)檢測服務、real-timepcr實驗技術服務。

（一）如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶，吸出培養液，僅留下10ml培養液在瓶內繼續培養。
(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養。具體步驟如下：
1. 棄去培養液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱，然后又將培養瓶倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養培養瓶，細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基，吸出，分到新的培養瓶中。一傳二。傳代后一半用我們的培養基，一半用你們的，以免細胞不適應而造成生長不好。