帶100ml一次性過(guò)濾裝置已滅菌的濾膜，設(shè)計(jì)用于過(guò)濾獲取和培養(yǎng)從飲用水、工業(yè)用水或其它含水樣品的微生物。過(guò)濾完畢后其自身可作為有蓋培養(yǎng)皿使用，也可很容易取出濾膜放入有蓋培養(yǎng)皿或瓊脂平板進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。

直徑47mm的水樣濾膜用于過(guò)濾捕捉水樣中的微生物，非常適合PowerWater? DNA Isolation Kit、PowerWater? RNA Isolation Kit和Rapidwate?r DNA Isolation Kit水樣試劑盒提取自來(lái)水、湖水、河水、污水、海水等水樣微生物總DNA/RNA。

水樣濾膜的保存：

經(jīng)過(guò)修改可以用于保存Sterivex unit濾膜。

酒精在這種場(chǎng)合起不了作用。經(jīng)驗(yàn)證明，無(wú)論用70%或者*酒精，結(jié)果只能使得核酸大量丟失甚至*降解。

清亮水樣

干凈水樣的濾膜可以干燥后室溫或-20℃冷凍保存在研磨管中（或sterivex unit中）。

冷凍干燥條件下濾膜上的DNA和RNA通常都很穩(wěn)定。使用平的過(guò)濾濾膜時(shí)，這么處理是zui省事的。因?yàn)椋氐綄?shí)驗(yàn)室后可直接加入裂解緩沖液進(jìn)行后續(xù)處理，無(wú)需轉(zhuǎn)移濾膜。對(duì)于使用Sterivex的，可用PowerWater? Sterivex? DNA Isolation Kit，無(wú)需剪開過(guò)濾器取濾膜。

渾濁或者受污染水樣

渾濁或受污染水樣過(guò)濾濾膜也可以干燥保存在PowerWater的研磨管中。4℃保存條件下的樣品，得到的DNA完整性比室溫保存的更好。為了獲得高質(zhì)量DNA，短期室溫zui多只保存3天，若干燥冷凍可*保存。

我們也測(cè)試了LifeGuard Soil Preservation Solution對(duì)濾膜DNA、RNA的保護(hù)。對(duì)于渾濁樣品，能有效減少核酸降解。加入2-4ml LifeGuard到裝有已過(guò)濾水樣濾膜的研磨管中，浸潤(rùn)濾膜為度。4℃或更低溫度*保存（＞一周）。

處理使用LifeGurad保存水樣濾膜前，先離心。盡可能吸掉保護(hù)液，避免其過(guò)分稀釋裂解緩沖液。另，為了使保護(hù)液盡可能去除，也可以把濾膜與研磨珠分開保存。

含大量金屬離子水樣

有些取自酸性礦洞或者地下洞穴的樣品，腐植酸含量不高，卻有可能含有大量金屬離子。從PowerWater DNA Isolation Kit使用者反饋的信息可了解到，試劑盒所采用的IRT技術(shù)足可以*去除金屬離子并獲得高質(zhì)量PCR等級(jí)的DNA。

關(guān)于如何選擇過(guò)濾膜：

跟研究水樣的科學(xué)家聊天的時(shí)候，他們常常提到，過(guò)濾提取水樣DNA、RNA很不容易。因?yàn)樗鼈兾⑸镓S度低（似乎水源情況）而且珍貴。

為什么說(shuō)做水樣微生物分子生物學(xué)研究不容易？

對(duì)于許多研究者來(lái)說(shuō)，不可能做到幾個(gè)月或者幾年一次地經(jīng)常回到水源地反復(fù)采樣。比如南極、波羅的海深海熱泉。有些是收集特定事件發(fā)生后的水樣，如洪水、暴雨。水樣環(huán)境每個(gè)星期甚至每天都不一樣。所以，他們需要從每個(gè)樣品中獲得準(zhǔn)確的微生物信息。

選擇濾膜：

對(duì)于研究濾膜上過(guò)濾水樣的微生物多樣性，的濾膜直徑47mm的。這個(gè)尺寸水既容易過(guò)濾，又能滿足DNA、RNA的提取需求。直徑太小（25mm）的濾膜容易堵塞，太大（147mm）則需要剪碎以適應(yīng)5ml或15ml標(biāo)準(zhǔn)管子。事實(shí)上，對(duì)水樣濾膜額外處理越少，越能回收到更多微生物DNA和RNA。

MOBIO實(shí)驗(yàn)室使用了一個(gè)5ml螺紋tube管（如左圖），為大家展示47mm濾膜高效提取而無(wú)需剪碎。該研磨管允許石榴石研磨珠充分接觸濾膜過(guò)濾面。經(jīng)過(guò)大量*研究，還發(fā)現(xiàn)此研磨管能zui大限度回收所有類型濾膜的DNA。

另一個(gè)常遇到的問(wèn)題是，如何選擇濾膜類型。濾膜有很多種，如聚苯醚砜濾膜、混合纖維素酯薄膜、氧化鋁薄膜等。每種薄膜的使用方法不一，在提取的時(shí)候會(huì)得到截然不同的結(jié)果。薄膜的理化特性也決定了其應(yīng)用范圍。當(dāng)然，對(duì)于提取DNA和RNA，孔徑大小、水樣過(guò)濾量、抑制因子（如殺蟲劑）吸附能力等因素更為重要。換句話說(shuō)，你有很多種濾膜可選擇。

我們的使用經(jīng)驗(yàn)：

聚苯醚砜濾膜（Polyethersulfone）：

zui結(jié)實(shí)的濾膜之一，可以過(guò)濾比其它濾膜更多的水樣。使用真空泵可快速抽干，易于折疊不易撕破。能抵受真空泵長(zhǎng)時(shí)間高壓力的濾過(guò)。若需要過(guò)濾大量低微生物含量的清亮水樣，0.22mm濾膜的更合適。在提取核酸時(shí)，得率可與PowerWater? DNA 和RNA Isolation Kits中自帶的混合纖維素酯濾膜相媲美。

混合纖維素酯濾膜（膜醋酸纖維素、硝酸纖維素）:

0.45μm孔徑zui合適材質(zhì)。如果你的水樣渾濁，使用0.22μm濾膜過(guò)濾緩慢容易堵塞時(shí)，建議使用0.45μm孔徑的濾膜。纖維素濾膜吸水性強(qiáng)，不好處理。貼一個(gè)我們實(shí)驗(yàn)室做的演示視頻。

有文獻(xiàn)顯示殺蟲劑和除草劑很容易吸附到纖維素濾膜上。若你的樣品含有殺蟲劑和除草劑，避免使用這類濾膜。

聚碳酸酯濾膜（Polycarbonate）:

這種濾膜很薄且容易起褶皺，所以不太好用。通常用0.45μm孔徑的濾膜來(lái)預(yù)防過(guò)濾時(shí)發(fā)生阻塞。不像聚醚砜膜（PES）和混纖膜（MCE），水樣中微生物會(huì)停留在濾膜表面。使得濾膜很容易阻塞，本該濾過(guò)的小顆粒也會(huì)截留下來(lái)。實(shí)驗(yàn)證明，珠磨研磨破碎強(qiáng)度越小，獲得DNA分子量越大。如果你的樣品只是用來(lái)做PCR，可以采用強(qiáng)力的研磨方法提高得率，暫時(shí)忽略片段破碎。

氧化鋁（Aluminum Oxide）:

這類濾膜又稱為Anodisc?過(guò)濾膜（Whatman）。手感接近于薄片玻璃，任何類型研磨珠都能輕易破碎。很多實(shí)驗(yàn)室不愿意使用，因?yàn)椴缓梅湃氲?/span>Tube中保存。通常用于微生物量少的海水。有0.45μm和0.22μm孔徑規(guī)格。像聚碳酸酯濾膜一樣微生物細(xì)胞大多停留在濾膜表面多于陷入濾膜內(nèi)，更利于DNA和RNA的提取，不過(guò)珠磨研磨時(shí)會(huì)增加核酸片段的剪切。

如何折疊濾膜：

大部分人折疊濾膜放進(jìn)Tube管的操作已經(jīng)非常嫻熟了。對(duì)于新手，我們提供了一個(gè)演示視頻。視頻中操作的是一個(gè)0.45μm的混合纖維素酯濾膜。操作者是PowerWater? kit的*Heather Callahan博士，由技術(shù)總監(jiān)Nik von Atzigen解說(shuō) 。

我們深知提取環(huán)境水樣不好做，獲取每滴水中的DNA、RNA也同樣非常重要。所以在開發(fā)PowerWater?和RapidWater? 產(chǎn)品的時(shí)候，從研磨用的Tube管、研磨珠的選擇、去抑制因子的溶液、吸附溶液、沖洗溶液到zui后的洗脫，我們盡可能優(yōu)化到每一個(gè)步驟。我們的目的是盡量讓你每一步都能夠做成功。如果你有任何關(guān)于水樣DNA、RNA提取方面的問(wèn)題，請(qǐng)告訴我們