10606ES TRIeasy總RNA提取試劑
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 10606ES
- 產地 上海
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2024/9/4 17:33:26
- 訪問次數 2131
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企業簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質改造和酶進化技術為驅動，聚焦生命科學產業鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發、生產與銷售的高新技術企業，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑，成為國內少數同時覆蓋三大品類生物試劑、兼備核心技術自主研發能力和規模化生產能力的高新技術企業，產品廣泛應用于生命科學研究領域、診斷與檢測領域和生物醫藥領域。
主營業務
公司憑借在蛋白質改造和酶進化領域的技術優勢和深耕生物試劑行業多年積累的豐富經驗，構建了品質優良、類型齊全、種類豐富的產品管線。自公司成立以來，公司研發、生產和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養系列、細胞轉染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應用于生命科學研究、診斷檢測和生物醫藥等領域。
發展歷程
榮譽資質
翌圣生物通過申請商標和軟件著作權的方式保障核心技術和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設。截至2022年3月31日，公司已經獲得授權18項（其中發明14項、實用新型1項、外觀設計3項）和45項與生物試劑相關的軟件著作權，擁有經國家知識產權局商標局核準的注冊商標權37項以及4項境外注冊商標，是國家高新技術企業和上海市專精特新企業。
創新平臺
經過多年的產品研發技術經驗的沉淀以及持續的研發創新，翌圣生物積極開展“產學研”合作，與擁有生物催化與酶領域國家重點實驗室的湖北大學、擁有教育部工業生物領域重點研究基地的江南大學展開合作，優化生物試劑關鍵原料的生產和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術、生物信息技術、細胞生物學技術、免疫學技術、生化分析技術等生命科學領域的共性生物技術為基礎，建立了六大核心技術平臺——雙向分子酶理性設計與定向進化平臺、密度發酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關鍵原料研發平臺、高通量測序建庫試劑創新研發平臺、高性能單克隆抗體研發平臺和mRNA醫藥應用研發平臺，目前已經自主研發出20項核心技術，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術開發路徑，覆蓋技術研發、產品升級、規模生產和質量控制等生物試劑研發和生產的各關鍵環節。
工業化生產
翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設運營的工業化生產基地，配有噸級發酵線、工業級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質量管理體系認證，從原料控制、生產管理、質檢管控、倉儲運輸等對生產線進行360度管理監督，保證產品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產品。
客戶服務
翌圣生物憑借優質穩定的產品質量、高效及時的響應能力、快速穩定的交付能力和周到完備的售后服務獲得了眾多科研用戶和工業用戶的認可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學研究實驗室提供應用于科學研究、體外診斷、基因測序、生物醫藥等的生物試劑。與中國科學院、清華大學、北京大學、復旦大學、上海交通大學、浙江大學等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業客戶建立了穩定、緊密的合作關系，公司產品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發表中。
公司企業文化
幫助客戶創造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學工具領域全球Top⑩
◎ 具備驅動產業變革的技術創新能力
◎ 擁有一支持續學習型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術創新和產品升級，不斷拓展核心技術的應用領域，為客戶提供更為的產品與服務，助力我國打造自主可控的生物試劑產業鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰略，繼續布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產業發展貢獻力量。
分子生物學試劑，細胞生物學試劑，免疫學試劑，蛋白組學試劑等
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 10606ES60 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
TRIeasy總RNA提取試劑(TRIeasy Total RNA Extraction Reagent)
TRIeasyTM Total RNA Extraction Reagent是一種適用于各種動植物、細菌組織、細胞的總RNA抽提試劑，具有*的裂解能力，可在短時間內裂解細胞和組織樣本，并有效抑制樣本中RNA的降解，保持RNA的完整性。樣品在該試劑中能夠充分裂解，之后加入氯仿離心分層，形成上清層、中間層和有機層(鮮紅色下層)，RNA分布在上層水相中，收集上清層后，經異丙醇沉淀便可得到總RNA。提取的總RNA純度高，基本不含蛋白質及基因組DNA，可直接用于Northern、點雜交、mRNA純化、體外翻譯、RT-PCR、poly(A)+選擇、RNA酶保護分析以及構建cDNA文庫等多種分子生物學實驗。
此外，樣品中的DNA和蛋白也能以沉淀的方式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA，而在有機層中加入異丙醇能沉淀出蛋白。
本品操作簡單快速，所有操作可在一小時內完成。對少量的組織(50-100 mg)和細胞(5×106)以及大量的組織(≥1 g)和細胞(>107)均有較好的裂解效果。
運輸與保存方法
冰袋運輸。4℃避光保存，有效期一年。
注意事項
1. 本產品中含有苯|酚，具有毒性和腐蝕性。如果吸入體內、接觸皮膚、吞食等會引起中毒、灼傷及其他身體傷害。使用時應穿戴防護物，如防護|服裝、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接觸到眼睛時，應立即用大量的水沖洗并前往醫院治療。
2. 請穿實驗服并佩戴一次性手套操作，避免RNase污染。
3. 需自備氯仿、異丙醇（新開封或提取RNA專用）、75%乙醇 (DEPC處理水配制)、DEPC和DEPC處理水。
4. 樣品用Total RNA Extraction Reagent勻漿后，如果不加入氯仿進行下游實驗，可先-70℃凍存，可保存一個月以上。
5. RNA沉淀在75%乙醇中，4℃可保存1周，-20℃可保存1年。
6. RNA半衰期比較短，易降解，建議抽提后盡快進行后續實驗。
參考用量
表1 每毫升Total RNA Extraction Reagent能夠充分裂解的最大樣本量
樣本類型 | 樣本使用量 |
貼壁細胞 | 10 cm2培養面積 |
懸浮動植物細胞或酵母細胞 | 5×106-1×107個 |
細菌 | 107個 |
動物組織 | 50-100 mg |
植物組織(多糖和多酚含量不高的) | 50-100 mg |
注：過多的樣本量可能會導致裂解不充分，并使產物純度降低。
操作流程
1. 樣品的處理
1) 樣品勻漿
A. 貼壁細胞
棄去培養液，直接往直徑3.5 cm的培養板中加入1 mL Total RNA Extraction Reagent，覆蓋并反復吹打裂解細胞。
注：1. 依據培養板的面積而不是細胞的數量來決定Total RNA Extraction Reagent的所需量（每10 cm2 加1 mL）。
2. 加入Total RNA Extraction Reagent量不足時，會導致DNA污染。
3. 貼壁細胞往往不能*從培養瓶（皿）脫落，這并不意味著裂解不*。此時，細胞膜實際已*裂開，并釋放RNA，繼續后續實驗即可。
B. 懸浮細胞
離心收集細胞沉淀，每5×106-1×107個細胞加入1 mL Total RNA Extraction Reagent，用移液器反復吹打。
注：加入Total RNA Extraction Reagent前應避免洗滌細胞，否則會增加mRNA降解的可能性。裂解某些酵母和細菌可能需要使用勻漿器。
C. 動、植物組織
取-70℃凍存動物組織在液氮中充分研磨，按照表1加入適當量Total RNA Extraction Reagent混勻。或取新鮮動植物組織盡量剪碎，加入適當量Total RNA Extraction Reagent，勻漿儀進行勻漿處理。
注：樣品體積不要超過加入Total RNA Extraction Reagent體積的10%。
2) 將勻漿樣品劇烈震蕩后在室溫條件下放置5分鐘以使核蛋白體*解離。
3) （可選）4℃，12000 g 離心10 min，取上清。
注：離心可去除樣品中較多蛋白質、脂肪、多糖或肌肉，植物的塊莖結節等。離心后的沉淀中包含有細胞外膜、多糖以及高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織樣品時，上層是大量油脂應盡量去除，取澄清的勻漿液進行后續實驗。
2 總RNA提取
1) 向上述裂解液中加入1/5體積氯仿（如每1 mL Total RNA Extraction Reagent加入0.2 mL氯仿）。蓋緊離心管蓋，劇烈震蕩15 sec，室溫靜置2-3 min。
2) 4℃，12000 g 離心10-15 min。
注：1. 離心后混合物可分3層：上層無色水樣層，中間層，下層紅色有機苯|酚氯仿層。RNA存在于水樣層中。
2. 上層容量約為所加Total RNA Extraction Reagent總量的50-60%。如加入1 mL Total RNA Extraction Reagent，上層水相約為500-600 μL。建議吸取400-500 μL，以防吸到中間層造成DNA污染。
3. 有機相和中間層是蛋白和DNA，可用于后續抽提。
3) 小心吸取上層水相至新離心管中，加入1/2體積異丙醇（如每1 mL Total RNA Extraction Reagent加入0.5 mL 異丙醇）。顛倒混勻后室溫放置10 min。
4) 4℃，12000 g 離心10 min。
注：RNA沉淀在離心前通常不可見，離心后在管側和管底形成膠狀沉淀。
5) 小心棄去上清，加入等體積 75%乙醇（DEPC水配制，如每1 mL Total RNA Extraction Reagent加入1 mL 75%乙醇）。渦旋充分洗滌，并輕彈管底，讓沉淀懸浮起來。
6) 4℃，7500 g 離心5 min，棄上清，注意不要丟失RNA沉淀。
注：剩余的少量液體可短暫離心，然后用槍頭吸出，注意不要吸到沉淀。
7) 室溫放置空氣干燥5-10 min。加入30-100 μL 無RNase水溶解RNA，待*溶解后，取少量檢測，其余溶液-70℃保存。
注：RNA沉淀不能*干燥，過分干燥會導致RNA溶解度降低。
3 產物檢測
A. RNA完整性檢測
1) 取1 μL RNA加入適當RNA loading buffer，混勻。
2) 進行電泳檢測。若出現清晰的三條帶，證明RNA完整性較好。
B. RNA純度檢測
檢測260 nm，280 nm OD值，并計算A260/A280比值。純的RNA的比值應在2.0左右。
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