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化工儀器網>產品展廳>試劑標物>行業專用試劑>生化與分子生物學用試劑>D1140 無內毒素質粒小量提取試劑

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D1140 無內毒素質粒小量提取試劑

參考價 280
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱 北京索萊寶科技有限公司
  • 品牌 SOLARBIO/索萊寶
  • 型號 D1140
  • 產地 北京
  • 廠商性質 其他
  • 更新時間 2017/10/6 22:48:58
  • 訪問次數 908

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!


北京索萊寶科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的高科技生物企業。

總部位于北京,并在全國設有經銷或代理機構。產品因可靠而穩定的質量和較為完善的售后服務確立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創新為宗旨”的發展理念,擁有專業的研發和質量檢測團隊以及*的倉儲和物流系統。“Solarbio”已經得到全國科研工作者的認可,成為廣大經銷商推崇的。

公司擁有一批專業的研發人員,我們專注于生物產品的不斷完善和創新。產品覆蓋面廣,品質可靠。先后開發了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物醫學等領域的多種試劑及試劑盒。同時,索萊寶公司提供各種常規生化試劑,庫存常備產品多達10000多種,可隨時為廣大科研工作者提供各類專業試劑。在質量方面,索萊寶謹記公司信念:質量高于一切。所有研發的產品都設有嚴謹的生產流程,科學的質量檢測方法和成熟的質量檢測程序,我們恪守對每一位用戶的承諾:用專業的態度做專業的品牌。同時,公司組建了一支專業的技術服務隊伍,能夠為科研工作者提供專業的技術服務。每一位購買索萊寶產品的用戶都能夠得到專業的咨詢和完善的售后服務。

索萊寶公司堅持與接軌,注重和*企業的合作與交流,并提供產品代理、市場咨詢等多項服務。公司將一如既往與世界更多合作,不斷為廣大生物科研工作者提供更優質的產品和服務。公司理念:“為科研服務,為生命盡責”。一個人能夠走多遠,取決于與誰同行。索萊寶公司期待與各同行精誠合作。

索萊寶誠招生物試劑研發人員,期待與廣大同行精誠合作,為廣大科研工作者提供優質的產品,高效的物流以及專業的售后服務。索萊寶感謝所有朋友的支持與幫助,您的支持是我們前進的動力和保障。讓我們攜手同行,共同創造美好的明天。

2016年索萊寶獲得*認證。

技術推廣;技術轉讓;技術咨詢;技術服務;生物試劑技術開發;銷售生物試劑盒、實驗室專用化學試劑、實驗室專用設備、辦公用品、化工產品(不含危險化學品)、計算機軟件及輔助設備;貨物進出口、技術進出口、代理進出口;委托加工生產生物制品、生化制品、化工產品(不含危險化學品);生產生物試劑盒;批發第一類醫療器械、第二類醫療器械;批發第三類醫療器械。

產品名稱:無內毒素質粒小量提取試劑盒
產品編號:D1140
規格:50T/100T 
保存:常溫干燥保存,復檢期為一年。
產品說明: 
  無內毒素質粒小量提取試劑盒采用堿裂解法裂解細胞,根據離心吸附柱在高鹽狀態下特異性地結合溶液中的 DNA 的原理特異性提取質粒 DNA。  離心吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附 DNA,可大限度去除雜質蛋白及細胞中其他有機化合物。 Solarbio 公司研制的內毒素清除劑,可大限度地除去內毒素。從 1-5ml 大腸桿菌 L培養液中,可快速提取 5-15μg 高純度質粒 DNA,提取率達 85-90%。使用提取的質粒 DNA 純度高,可直接用于細胞轉染等要求較高的實驗,以及其他各種常規操作,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶體上的標簽。溶液P1在使用前先將試劑盒中提供操作步驟: 
1、取1-5ml細菌培養物,12000rpm離心1min,吸除上清(菌液濃度較低時可多次離心收集到一個離心管中) 。
2、向留有菌體沉淀的離心管中加入200μl溶液P1(請先檢查是否已加入RNaseA) ,使用移液器或旋渦振蕩器*懸浮細菌細胞沉淀。注意:如果菌塊未*混勻,會影響裂解導致質粒提取量和純度偏低。 
3、向離心管中加入200ul溶液P2,溫和地上下翻轉6-8次使菌體充分裂解。注意:混勻一定要溫和,以免污染細菌基因組DNA,此時菌液應變得清亮粘稠,作用時間不要超過5 min,以免質粒受到破壞。 
4、 向離心管中加入200ul溶液P3, 立即溫和地上下翻轉6-8次,充分混勻,此時會出現白色絮狀沉淀。 12000rpm的RNaseA全部加入,混勻,置于 2-8℃保存。如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。離心10 min,用移液器小心地將上清轉移到另一個干凈的離心管中,盡量不要吸出沉淀。注意:溶液P3加入后應立即混合,避免產生局部沉淀。如果上清中還有微小白色沉淀,可再次離心后取上清。 
5、加入上清1/5體積的冰上預冷的內毒素清除劑,振蕩混勻,溶液變渾濁,冰浴2min至溶液變清亮。 
6、37℃水浴5min,不時振蕩,溶液又變渾濁。12000rpm室溫離心5min,溶液應分為兩相,上層水相含質粒DNA,下層油相含內毒素。 
7、將含質粒DNA的上層水相轉移至新管,棄下層油相,注意不要吸入油狀相。重復步驟5-7三次。 
8、加入600ul的結合液,充分混勻后加入吸附柱中,室溫放置2min,12000rpm離心1min,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。如果溶液量多可分多次加入。 
9、向吸附柱中加入700ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 
10、向吸附柱中加入500ul漂洗液,12000rpm離心1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。 
11、12000rpm離心2min,將吸附柱敞口置于室溫或50℃溫箱放置數分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續的實驗如酶切、PCR等。 
12、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜*懸空滴加50-200ul經65℃水浴預熱的洗脫液,室溫放置2min,12000rpm離心1min。 
13、為了增加質粒的回收效率,可將得到的洗脫液重新加入吸附柱中,室溫放置2min,12000rpm離心1min。 
注意事項: 
1.  使用前請先檢查溶液 P2、P3 和結合液是否出現混濁,如有混濁現象,可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。 
2.  洗脫緩沖液體積不應少于 50ul,體積過小影響回收效率;洗脫液的 pH值對洗脫效率也有影晌,若需要用水做洗脫液應保證其 pH值在 8.0 左右(可用 NaOH 將水的 pH值調至此范圍), pH值低于 7. 0 會降低洗脫效率。DNA產物應保存在-20℃,以防 DNA 降解。 
3.  質粒DNA濃度>1mg/ml時清除內毒素效率降低。由于質粒DNA本身的性質,清除過程可導致部分質粒DN丟失,但內毒素卻能得到大限度清除。 
4.  所有溶液應用無內毒素的高純水配制,所有器械材料均應不含內毒素,玻璃器皿可高溫烘烤,非揮發性水溶液可高壓處理。 
5. DNA濃度及純度檢測:得到的質粒DNA純度與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關。  得到的DN可用瓊脂糖疑膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 DNA應在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為 1 相當于大約 50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。OD260/OD280比值應為 1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響吸光值,但并不表示純度低。  
相關產品:
D1150    無內毒素質粒大量提取試劑盒    10T
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D2300    真菌基因組DNA提取試劑盒    50T/100T
D2400    DNA病毒基因組提取試劑盒    50T/100T
D2600    土壤基因組DNA提取試劑盒    50T/100T
D2700    糞便基因組DNA提取試劑盒    50T/100T



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