Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
參考價(jià) | ¥ 10 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 北京索萊寶科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào)
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2016/11/15 9:47:46
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Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
品 牌:solarbio
中文名稱:瓊脂糖凝膠CL-4B
英文名稱:Sepharose CL-4B
貨 號(hào):S8741
供應(yīng)商:北京索萊寶科技有限公司
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Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 CL-4B說(shuō)明書
交聯(lián)瓊脂糖凝膠 CL-4B是在4B瓊脂糖微球的基礎(chǔ)上通過(guò)交聯(lián)使微球的剛性增強(qiáng),理化性能提高,有利用于工業(yè)生產(chǎn)。該介質(zhì)用于生物大分子的凝膠層析。
1 外觀
本品為白色球狀凝膠,無(wú)嗅、無(wú)味、無(wú)肉眼可見雜質(zhì)。
2 理化指標(biāo)
項(xiàng) 目 | 指 標(biāo) |
基 質(zhì) | 4% 交聯(lián)瓊脂糖 |
排阻極限 | 60000~20×106 (球蛋白) |
形狀 | 球形 |
粒徑 | 45~165μm |
高流速 | 30 cm/h* |
耐壓 | 0.025 MPa |
pH適用 | 3~13 (長(zhǎng)時(shí)間) ,2~14(短時(shí)間,在位清洗) |
化學(xué)穩(wěn)定性 | 可耐8mol/L尿素、6mol/L鹽酸胍;可耐有機(jī)溶劑,如乙醇、DMF、THF、DMS、CH3Cl、丙酮、二甲基甲酰胺、二氯乙烷、吡啶、乙腈 |
*檢測(cè)條件: 層析柱10mm×300mm *柱床高15cm,25℃,流動(dòng)相為0.1mol/LNaCl。
3 包裝
Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
以聚胺酯瓶密封包裝,外貼標(biāo)簽。
4 貯存
Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
應(yīng)密封貯存在4℃~25℃(保存溶液為20% 乙醇),通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。
用過(guò)的柱子貯存在4℃(20% 乙醇)。
5 注意事項(xiàng)
Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
應(yīng)避免與氧化劑接觸,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中。
6 運(yùn)輸
運(yùn)輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運(yùn)。
7 保質(zhì)期
5年。
8 應(yīng)用
Sepharose CL- 4B 瓊脂糖凝膠CL-4B
具有很高的化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、較好的機(jī)械性能、可多次重復(fù)使用等特點(diǎn),非特異性吸附低,回收率高,可用有機(jī)溶劑及1~2mol/L 的NaOH在位清洗,適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的凝膠色譜純化。
下面簡(jiǎn)要介紹介質(zhì)的使用過(guò)程。
8.1 裝柱
凝膠過(guò)濾介質(zhì)的使用對(duì)裝柱的要求較高,為了保證分離效果,一般通過(guò)柱子上加一個(gè)裝柱器來(lái)使分離柱裝滿凝膠,或采用帶有軸向加壓裝置的柱子。凝膠柱床一般高于60cm。裝柱效果可用染料或丙酮-水溶液進(jìn)行檢驗(yàn)。
以下過(guò)程為通用介質(zhì)裝填過(guò)程。若為帶有軸向加壓裝置的柱子,可在柱床穩(wěn)定后將柱床壓緊,接好管路。
(1)讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制緩沖液。凝膠層析上樣、平衡和洗脫只用一種低鹽濃度的緩沖液。
(2)選擇一根一定直徑的柱子,長(zhǎng)約30~60cm,根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠(約為柱床體積的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1的比例)配成勻漿。
(3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤(rùn)濕并保持一小段液位(液面略高于濾膜),務(wù)必使底端無(wú)氣泡。
(4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,連結(jié)好柱子頂端柱頭。
(5)打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過(guò),使柱床穩(wěn)定。用緩沖液平衡柱子,到柱床穩(wěn)定。
(6)好用一個(gè)裝柱器輔助裝柱。裝完后柱床上端輕輕刮平,上好柱頭。
8.2 平衡
讓緩沖液以一定流速流過(guò)柱子,到流出液電導(dǎo)和pH不變。
8.3 上樣
(1)樣品用緩沖液配制,渾濁的樣品要離心和過(guò)濾后上樣。含鹽量過(guò)大、濃度過(guò)小的樣品要先做處理,再上樣。
(2)質(zhì)對(duì)樣品組分的分離是按組分分子量大小進(jìn)行的,分子量大的先流出來(lái)。
(3)樣體積約為柱體積的1~2%,越小分離越好。
8.4 洗脫
用緩沖液洗脫,洗脫中保持流速、緩沖液組成不變。
8.5 再生
一般用緩沖液洗到平衡,可再次使用。
8.6 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,始終要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。
若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時(shí)洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。
8.7 在位清洗
(1)對(duì)于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白,可以用2M Nacl去除。
(2)對(duì)沉淀蛋白、對(duì)以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類,可用1M NaOH 去除。
(3)對(duì)強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等,用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗,但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加,否則容易產(chǎn)生氣泡。
清洗完畢后,用至少3倍緩沖液平衡柱子。
8.8 注意
在裝柱、使用和保存柱子的時(shí)候,要避免柱子流干氣泡進(jìn)入。
8.9 去熱源
用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時(shí)或用0.1M的氫氧化鈉24小時(shí)。或用以下方法步驟去除:
(1)2倍柱體積的70%乙醇;
(2)2倍柱體積50mM Tris-Hcl pH7.5;
(3)1倍柱體積4M尿素;
(4)3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl;
以上緩沖液都在無(wú)熱源的雙蒸水中配制。
8.10 消毒
用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積,初始緩沖液平衡柱子。