膠原蛋白是脊椎動(dòng)物體內(nèi)最豐富的蛋白質(zhì)，存在于皮膚、軟骨、骨、椎間盤(pán)、血管、肌腱、韌帶和角膜中，是細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的主要成分。I型膠原由兩條相同的α1鏈和一條不同的α2鏈組成，形成稱(chēng)為原膠原的三螺旋結(jié)構(gòu)。這種三螺旋構(gòu)象增加了組織的結(jié)構(gòu)強(qiáng)度和抗酶降解能力，在形成細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)程中起著關(guān)鍵作用。

膠原蛋白有助于促進(jìn)組織再生和/或靶向藥物釋放，因?yàn)樗哂械涂乖浴⒌投尽⒏咚苄浴⒏呱锝到庑浴?/span>I型膠原結(jié)合整合素，促進(jìn)細(xì)胞遷移、附著以及增殖和分化。盡管通過(guò)胃蛋白酶消化從原膠原中去除N-和C-末端原膠原被廣泛用于工業(yè)用途，但原膠原作為含有交聯(lián)末端肽的天然膠原支架可能是有益的。

     　Chondrex公司提供酸性I型原膠原溶液，實(shí)驗(yàn)中形成傳統(tǒng)的二維以及三維膠原凝膠支架，用于模擬成纖維細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng)。

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產(chǎn)品定購(gòu)：

操作流程：

l  包被流程（注：具體的包被的條件需要根據(jù)培養(yǎng)系統(tǒng)優(yōu)化）

1. 用0.02mol/L的鹽酸把4mg/ml的膠原稀釋至50-100ug/ml。2.

2.   　溫和混勻稀釋后的溶液。
   

3. 取適量的稀釋后的膠原加入微孔內(nèi)或酶標(biāo)板。

   注：保證整個(gè)表面包被完全。

4. 37℃或室溫孵育1-2小時(shí)

5. 棄掉所有溶液。

6. 用培養(yǎng)基或者PBS洗板。

7. 包被好的微孔或酶標(biāo)板可以保存于2-8℃，或者如果環(huán)境無(wú)菌的話(huà)可以在空氣中晾干。

l  三維凝膠制備流程：

1. 用等體積滅菌的冷PBS溶液稀釋膠原溶液至2mg/ml。

2.   　加入適量稀釋后的膠原到孔內(nèi)或板內(nèi)。

3. 37℃孵育30~60分鐘。

4. 凝膠可以保存于2-8℃或者空氣中晾干（如果為無(wú)菌環(huán)境）。

參考文獻(xiàn)：

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