1、石蠟包埋病理服務-脫水
酒精是制片常用的試劑,可與水互溶,酒精的脫水能力較強,對于組織會有明顯的收縮作用。因此用酒精作為脫水劑時,應先從低濃度酒精開始,濃度遞增,這樣可以避免組織過度收縮。目前有些脫水機具備震搖功能,這樣可加快脫水進程。
2、石蠟包埋病理服務-透明
組織脫水后,要經過浸蠟透明的過程,使石蠟滲透到組織中去,達到包埋的支持作用。由于脫水劑如酒精與石蠟不溶,因此使用一種與酒精和石蠟都互溶的媒劑將酒精置換掉,待酒精被取代后,組織成透明狀態,即透明。
3、石蠟包-浸蠟
透明后即可將組織浸入溶解的石蠟進行浸蠟,石蠟逐漸浸入組織間隙,取代透明劑,這一過程叫浸蠟。石蠟的質量和熔度與切片質量密切相關,所用的石蠟有的熔點和硬度。
4、-包埋
包埋,就是將浸蠟的組織塊從溶解的石蠟中取出,放入充滿熔融石蠟的包埋框內,使組織和包埋劑相熔并迅速冷卻的過程。包埋劑凝固后,加強了組織的硬度和韌度,從而利于切片。
5、-石蠟切片
在包埋以后,就可進行切片。包埋好的石蠟塊裝在切片機上,進行固著整修,通常切片厚度為3-5um,注意切片速度不宜太快,防止切片機震動厲害引起切片厚薄不均勻。切好的切片須貼附于載玻片上,一般采用撈片法,但切片常有細小的橫紋,經展平后才能貼附,否則影響染色和觀察。
組織切片是無色透明的,進行染色后才能觀察到各種微細結構,染色后的切片須再次經過脫水、透明、中性樹脂封片,待封藏劑凝固后便成為一張成功的石蠟切片。