免疫分析檢測方法的革新：全人源納米抗體新型熒光免疫探針成功研制
【化工儀器網 項目成果】熒光是自然界中常見的一種發光現象，不論是在日常裝飾品或者兒童玩具中都常有見到，其實它也常被用在科學研究中。因其優越的特性被廣泛使用在微觀研究中，例如植物細胞、動物細胞中特殊物質的追蹤及疾病的診斷監測，由于其高靈敏度及簡化了實驗方案及流程，都發揮了極大的優勢。
熒光成像的理論基礎是熒光物質被激發后所發射的熒光信號的強度在一定的范圍內與熒光素的量成線性關系。熒光成像系統包括熒光信號激發系統(激發光源、光路傳輸組件)、熒光信號收集組件、信號檢測以及放大系統(CCD、PMT)。熒光成像技術因其檢測靈敏度高、分辨率好、無輻射危害等優勢，在生物醫學領域有廣泛的應用前景。
然而，迄今只有少數幾種非靶向熒光染料應用于臨床腫瘤切除的手術指導，而基于各類靶向型生物制劑的熒光免疫探針大多尚處于臨床試驗階段。而目前正在開發的熒光免疫探針多是以單克隆抗體為載體，存在著體積較大，難以接觸具有空間位阻的靶點表位，不適宜于“即取即用”的臨床適用標準等問題。如何開發出新型熒光免疫探針，使其同時具有高靈敏度、高特異性、易體內代謝、低生產成本、高穿透深度等性質，從而為疾病診療與手術導航提供更全面精準的信息，一直是熒光成像領域亟需解決的難題。
全人源納米抗體，即基因完全來自于人類。近日，復旦大學基礎醫學院、上海市重大傳染病和生物安全研究院教授應天雷、副研究員吳艷玲團隊與復旦大學化學系教授李富友團隊合作，通過將腫瘤靶向的全人源納米抗體與某近紅外熒光染料進行共價偶聯，建立了以全人源納米抗體為靶向載體的新型熒光免疫探針研發平臺。
研究團隊利用自己開發的用于針對5T4腫瘤靶點、具有高親和力的抗腫瘤全人源納米抗體n501作為載體，并在抗體上修飾了名為吲哚菁綠(ICGM)的熒光染料，從而合成了新型全人源納米抗體熒光免疫探針，即ICGM-n501。在卵巢癌轉移瘤模型中，研究人員通過活體成像技術觀察到ICGM-n501具有良好的腫瘤靶向性，可以實現高精準的腫瘤成像，能高效識別其他技術無法找到的腫瘤微小病灶(僅1.38毫米大小)，成像精準度的分辨率高達0.21毫米。此外，研究人員還首次觀測到了探針結合腫瘤靶點后的近紅外二區熒光增強現象，結合5T4抗原等相關信息，以及計算化學分析其染料結構變化規律，團隊解析了相關機制。
與傳統的熒光染料相比，全人源納米抗體為靶向載體的新型熒光免疫探針具有熒光信號強、檢測靈敏度高、穩定性好等顯著優勢，其研發有助于進一步降低探針的使用劑量，提高熒光成像效果，同時為腫瘤的早期診斷、術中導航、療效評估等提供了精準、實時的“可視化”技術手段。
(資料來源：中國科學報)
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