隋志偉：基于免疫熒光流式技術(shù)的微生物快速檢測(cè)方法
【化工儀器網(wǎng) 會(huì)議新聞】作為最常見的食品安全問題，微生物污染已經(jīng)成為食品檢測(cè)的重點(diǎn)關(guān)注對(duì)象。雖然目前已經(jīng)有較多的微生物檢測(cè)技術(shù)，如發(fā)酵法、平皿培養(yǎng)法等，相關(guān)的技術(shù)、步驟等也在不斷優(yōu)化發(fā)展，但是常規(guī)的檢測(cè)方法仍然屬于傳統(tǒng)培養(yǎng)法，需要經(jīng)過培養(yǎng)富集、菌落計(jì)數(shù)或代謝物檢測(cè)以及人工判讀等步驟，不僅繁瑣耗時(shí)，精度也無法完全滿足現(xiàn)在的需求。因此我國已經(jīng)開始開發(fā)非培養(yǎng)、速度快、高靈敏的活微生物測(cè)量方法。
在第十四屆中國國際食品安全技術(shù)論壇CBIFS2021上，眾多食品安全領(lǐng)域的專家學(xué)者與技術(shù)人員匯聚一堂，分享和交流先進(jìn)的技術(shù)成果，其中也有許多新的微生物檢測(cè)方法涌現(xiàn)。如中國計(jì)量科學(xué)研究院副研究員隋志偉在微生物檢驗(yàn)及環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)專題論壇上就帶來了利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)微生物的報(bào)告《基于免疫熒光標(biāo)記與流式分析的微生物快速檢測(cè)方法研究》。
流式細(xì)胞術(shù)作為先進(jìn)的細(xì)胞定量技術(shù)，可以對(duì)處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的單個(gè)細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)的連續(xù)快速檢測(cè)。除了快速和多參數(shù)檢測(cè)之外，流式細(xì)胞術(shù)還有樣本制備簡(jiǎn)單、可以把指定特征的細(xì)胞分離出來等優(yōu)勢(shì)，已經(jīng)成為微生物測(cè)量溯源體系的參考測(cè)量程序。中國計(jì)量科學(xué)研究院對(duì)流式細(xì)胞術(shù)在微生物測(cè)量中的應(yīng)用就進(jìn)行了深入的研究。
在報(bào)告中，隋志偉研究院以乳品中痕量金黃色葡萄球菌快速靈敏檢測(cè)和乳品中單個(gè)沙門氏菌快速靈敏檢測(cè)為例，詳細(xì)介紹了流式細(xì)胞分析技術(shù)檢測(cè)微生物的原理方法。
在乳品中痕量金黃色葡萄球菌快速靈敏檢測(cè)中，中國計(jì)量科學(xué)研究院結(jié)合免疫熒光標(biāo)記與流式分析技術(shù)，建立了微生物活性表征與快速精確測(cè)量方法，其技術(shù)路線包括：為金黃色葡萄球菌添加特異性熒光標(biāo)記，進(jìn)行流式分析儀測(cè)量參數(shù)優(yōu)化(包括上樣體積、液流速度、分析時(shí)間等)，進(jìn)行最佳測(cè)量范圍和檢測(cè)限的評(píng)估，然后進(jìn)行不確定度評(píng)定，最后實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)測(cè)量。對(duì)于奶粉中沙門氏菌的檢測(cè)，中國計(jì)量科學(xué)研究院同樣建立了流式分析法。利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)主要有：速度快；靈敏度高，可實(shí)現(xiàn)單個(gè)致病菌檢測(cè)；區(qū)分死菌與活菌；不確定度小。
在報(bào)告的最后一部分，隋志偉還介紹了食品中微生物國家有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其應(yīng)用。我國已經(jīng)成功研制具有溯源性微生物國家一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，可以實(shí)現(xiàn)微生物在不同時(shí)間和空間的量值復(fù)現(xiàn)。食品微生物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)在能力驗(yàn)證和質(zhì)量控制中都能夠發(fā)揮重要作用，對(duì)于我國食品微生物檢測(cè)行業(yè)的發(fā)展有著很大的意義。
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