青島能源所開發(fā)出高覆蓋度的單細胞拉曼分選-測序技術(shù)
【化工儀器網(wǎng) 科技前沿】拉曼激活細胞分選耦合測序是菌群單細胞分析的重要手段，但其低基因組覆蓋度一直困擾著業(yè)界。中國科學院青島生物能源與過程研究所單細胞中心發(fā)明了全新的單細胞拉曼分選-測序技術(shù)RAGE-Seq，實現(xiàn)了菌群中單個目標細胞近100%覆蓋度的精準測序。該工作發(fā)表于Small。
微生物組是地球上能量與元素循環(huán)的主要載體，與人體、動植物以及環(huán)境的健康也息息相關(guān)。因此，微生物組的探測、理解和利用，將跨越“尚難培養(yǎng)微生物屏障”，帶來生命科學及其應用的共性突破。單細胞拉曼光譜能夠無需培養(yǎng)而快速識別菌群中細胞的各種代謝功能(Biotechnol Adv, 2019)，但是一直以來，針對菌群的單細胞拉曼分選和測序都面臨著兩個瓶頸：首先，如何無損快速地獲取特定拉曼表型的單個細胞；其次，如何高覆蓋度地獲得精確到一個細胞的基因組。
針對上述問題，青島能源所單細胞中心徐騰、公衍海、蘇曉璐等發(fā)明了一種在液相環(huán)境中測量與分選菌群中目標微生物單細胞的拉曼分選-測序耦合技術(shù)RAGE-Seq(Raman-activated Gravity-driven Encapsulation and Sequencing；圖1)。它通過聯(lián)用光鑷及微流控液滴技術(shù)，將特定拉曼表型的細菌單細胞從群體中精準分離，并包裹到皮升級液滴中，然后采用宏觀移液的方式便可將包裹有目標細胞的液滴導出轉(zhuǎn)移到試管中，從而快速、精確、簡便地實現(xiàn)“單個細胞-單個液滴-單個試管”的拉曼分選流程，可直接耦合下游細胞培養(yǎng)或基因組分析。
由于目標細胞在分選過程中始終包裹于水相環(huán)境中，RAGE-Seq有效降低了拉曼分選中激光引入的細胞損傷。其導出的單細胞液滴體系，經(jīng)過簡單震蕩后可轉(zhuǎn)變成乳化擴增體系，大幅度降低了傳統(tǒng)單細胞基因擴增(如單細胞MDA)中存在的偏好性，從而可從一個細胞得到近乎完整的全基因組信息。此外，其獨特的單液滴分選轉(zhuǎn)移形式，有效解決了單細胞分析中常見的污染問題。
基于單細胞中心前期發(fā)明的重水孵育單細胞拉曼藥敏快檢技術(shù)(Anal Chem, 2017)，研究人員用RAGE-Seq從臨床尿液樣本中直接識別和分選出耐受特定抗生素的臨床大腸桿菌，并進行了精確到一個細胞的全基因組測序，覆蓋度可達99.5%。這一高覆蓋度保證了基因組上所有耐藥基因突變均得以全面、精確地揭示。
從菌群中直接、精準地獲取一個細菌細胞的藥敏性表型及其完整基因組，以往還未有先例。因此，RAGE-Seq的這一獨特能力，預計將帶來臨床感染診斷和用藥、耐藥性傳播監(jiān)控與機制、海洋生態(tài)監(jiān)控與資源挖掘等領(lǐng)域的一系列突破。
基于RAGE-Seq，單細胞中心推出了臨床單細胞拉曼藥敏快檢儀CAST-R，以及和現(xiàn)有熒光/明場顯微鏡耦合的模塊式單細胞微液滴分離系統(tǒng)EasySort。這些原創(chuàng)的系列儀器正在服務(wù)各種場景下的單細胞功能分選與測序(圖1)。
該工作由單細胞中心馬波和徐健主持完成。該工作得到中科院戰(zhàn)略性先導專項、國家自然科學基金委、山東省自然科學基金委的資助。
關(guān)注本網(wǎng)官方微信 隨時閱讀專業(yè)資訊
- 創(chuàng)新驅(qū)動核心競爭力 奧譜天成閃耀高博會 2024-11-22 14:44:04
- 化工儀器網(wǎng)還有幸邀請到了奧譜天成(廈門)光電有限公司(以下簡稱：奧譜天成)科研儀器事業(yè)部大西北區(qū)總監(jiān)張世才先生接受采訪，就公司的發(fā)展歷程、技術(shù)創(chuàng)新、核心競爭力以及參展體驗等方面進行了深入的交流。
- 預算677萬 中國海洋大學采購實驗室儀器 2024-11-22 09:14:26
- 近日，中國海洋大學就“中國海洋大學細胞蛋白處理及分析系統(tǒng)等設(shè)備采購項目”發(fā)布公開招標公告，預算金額為677.1萬元。
- 預算490萬 華中師范大學采購可見分光光度計等 2024-11-21 09:24:04
- 近日，華中師范大學就“2024年度華中師范大學非線性SHG和Z掃描測試系統(tǒng)等設(shè)備購置”項目發(fā)布公開招標公告，預算金額為490萬元。
- 預算275萬 華南農(nóng)業(yè)大學采購實驗室儀器 2024-11-21 09:09:42
- 近日，華南農(nóng)業(yè)大學就“2024HWZB022華南農(nóng)業(yè)大學課題組儀器設(shè)備采購項目”發(fā)布公開招標公告，預算金額為275萬元。
- 預算793萬 南京農(nóng)業(yè)大學采購實驗室儀器 2024-11-20 10:05:24
- 近日，南京農(nóng)業(yè)大學就“南京農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)農(nóng)村部大豆病蟲害防控重點實驗室建設(shè)項目液相色譜串聯(lián)四級桿超高分辨質(zhì)譜聯(lián)用儀等儀器設(shè)備采購”發(fā)布公開招標公告，預算金額為793.2萬元。
版權(quán)與免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點或和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
