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- 20611ES05 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):901更新時(shí)間:2022-04-25 10:18:33
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 2MG |
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貨號(hào) | 20611ES05 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品描述
脂蛋白在人體中主要起到運(yùn)輸脂質(zhì)(如膽固醇、脂質(zhì)、甘油三酯)的作用,按照分子量大小,主要分為以下幾種(從高到低):乳糜(CM)、極低密度脂蛋白 (VLDL)、中間密度脂蛋白 (IDL)、低密度脂蛋白 (LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等。其中HDL是密度最高的脂蛋白,不像其他大分子脂蛋白,主要將脂質(zhì)運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞,HDL是將脂質(zhì)運(yùn)出細(xì)胞,因此,高密度脂蛋白具有清除血管內(nèi)多余血脂、清除血垢、清潔血管、維持細(xì)胞內(nèi)膽固醇量的相對(duì)衡定的作用,從而限制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展,起到抗動(dòng)脈粥樣硬化作用。
本品Human DiI-High Density Lipoprotein為熒光探針DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl- indocarbocyanine perchlorate)標(biāo)記的高密度脂蛋白,可以用來(lái)觀察培養(yǎng)細(xì)胞的HDL結(jié)合位點(diǎn),或篩選HDL受體表達(dá)缺陷型細(xì)胞突變株。也可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估細(xì)胞受體水平,或檢測(cè)組織內(nèi)的受體水平。
翌圣提供的Human DiI-HDL為無(wú)菌包裝,可以直接稀釋使用。除提供DiI-HDL,我們還提供不帶標(biāo)記的HDL,I125標(biāo)記的HDL。
制備方法
純化的人健康血漿來(lái)源的HDL直接標(biāo)記上DiI熒光探針,然后通過(guò)超速離心以及透析的方法純化回收標(biāo)記產(chǎn)物,并濾膜過(guò)濾除菌。純化的DiI-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。
產(chǎn)品性質(zhì)
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸;
4oC無(wú)菌避光,收到貨后可穩(wěn)定保存6周。千萬(wàn)不可凍存!使用時(shí)一定要無(wú)菌操作!
注意事項(xiàng)
1.本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定,建議即配即用;
2.長(zhǎng)期貯存可能會(huì)有沉淀析出,屬于正常現(xiàn)象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;
3.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
4.本產(chǎn)品僅作科研用途!
操作步驟
1.無(wú)菌條件下,將DiI-HDL用細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋至10-30 µg/mL。
2.加入活細(xì)胞內(nèi),37℃培養(yǎng)4-5小時(shí)。
3.孵育結(jié)束,吸去含有Human DiI-HDL的培養(yǎng)基,并用無(wú)探針的培養(yǎng)基洗幾次。
4.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。
4.1熒光顯微鏡觀察
采用標(biāo)準(zhǔn)的羅丹明激發(fā):發(fā)射濾光片(或建議使用波長(zhǎng)為:Ex/Em=549 nm/565 nm);若需要請(qǐng)使用含3%甲醛的PBS進(jìn)行固定,切勿使用甲醇或丙酮固定,因DiI易溶于有機(jī)溶劑。【注】: 需設(shè)陽(yáng)性細(xì)胞以做對(duì)照。
4.2細(xì)胞分選(流式細(xì)胞術(shù))
胰蛋白酶處理細(xì)胞或者加入EDTA制成單細(xì)胞懸液,選用合適的已標(biāo)記純化細(xì)胞用作陰性和陽(yáng)性對(duì)照,從而進(jìn)行流式分選設(shè)門(mén)(gate)。(建議使用波長(zhǎng)為Ex: 514/549 nm; Em: 565 nm)。
HB220412